肿瘤蜡块标本如何选定切片位置 组织切片基本技术流程包括?

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肿瘤蜡块标本如何选定切片位置

肿瘤蜡块标本如何选定切片位置 组织切片基本技术流程包括?

石蜡切片的原理和基本步骤?

1 .已修复:

组织切片基本技术流程包括?

将新鲜组织切成小块,在4%多聚甲醛中固定过夜。将组织中的物质成分固化,尽可能保持其在体内的结构。同时可以使组织变硬,有利于切片。

2.脱水:

为了减少组织材料的急剧收缩,应采用从低浓度到高浓度的顺序,从70\\%、85\\%、95\\%定色的组织材料需要去除留在组织中的定色液及其晶体沉淀,否则会影响后期的染色效果。

3.透明度:

常用的透明剂是二甲苯,是石蜡的溶剂。纯酒精不溶于石蜡,需要用可溶于酒精和石蜡的溶剂替换组织中的酒精。在透明剂的浸渍过程中,材料块被认为是透明的。

4.浸蜡:

首先,将组织材料块浸入熔融石蜡和二甲苯的等量混合物中1小时。连续移入两种熔融石蜡溶液中,浸泡约1小时。

5.嵌入:

盒底用少许热蜡液快速贴在包埋盒上,然后放在速冻台上固定石蜡。

6.切片:

切片刀的锋利程度和蜡块的硬度直接影响切片的质量。蜡块的硬度可以通过放入冷水中来改变。通常切片厚度为3-5um,用刷子轻托,放入37度水浴中使切片显影。

7.修补和烘烤:

一般用恒温水浴锅,温度控制在37-40℃左右,有利于石蜡切片的发育。贴好的切片在60℃的恒温箱中干燥2小时,待蛋白凝固后即可染色。

8.切片脱蜡和水合:

将干燥的切片在二甲苯中脱蜡,然后用纯酒精,95 \ \ %, 85 \ \ %, 70 \ \ %,从高浓度到低浓度依次水合。

9.染色:

经典苏木精和伊红:细胞核被苏木精染成紫蓝色,大部分细胞质和非细胞成分被伊红染成粉红色。实验操作简单。

免疫组织化学:指在组织细胞中原位通过抗原抗体反应和组织化学显色反应,用显色剂标记的特异性抗体。

石蜡切片的制作步骤(附图)?

1,材料

确定所选材料的来源和位置,纵向切割或横向切割;材料要快拿,防止进一步变化,材料量要合适。下图是植物芽的取样。

冰冻切片和石蜡切片的优缺点?

石蜡切片组织学是常规切片技术中广泛使用的方法。常用于观察正常细胞的形态结构。一般组织固定、密封制作一个玻片标本需要几天时间,但标本可以长期保存,是长期的显微玻片标本。

石蜡切片法包括取材、固定、清洗脱水、透明、浸蜡、包埋、切片粘贴、脱蜡、染色、脱水、透明、密封等步骤。一般组织固定、密封制作玻片标本需要几天时间,但标本可以长期保存,是长期显微玻片标本。。

冰冻切片的好处是可以更好的保存组织的抗原免疫活性,免疫组化中不需要抗原修复的步骤。缺点是容易在细胞内形成冰晶,破坏细胞结构,可能会使抗原扩散。由于其制备过程比石蜡切片更快、更简单,在外科手术中常被用于快速病理诊断。

与石蜡切片相比,冰冻切片简单易行。一般固定脱水后,在包埋剂中固定后,可以在冷冻切片机中切片。可以直接取一些新鲜标本,冷冻后涂上包埋剂,然后放在冷冻盘上速冻,冷冻后立即切片。

防止样品中出现冰晶是很重要的。一般来说,通过快速冷冻来减少样本中冰晶的形成,可以使组织温度急剧下降。也可将组织置于20% ~ 30%的蔗糖溶液中1 ~ 3天,用高渗溶液吸收组织中的水分,降低组织的含水量。

冰冻切片和石蜡切片的优缺点?

冰冻切片和石蜡切片各有什么优缺点?

1.从一抗的选择。有的一抗可以同时做石蜡切片和冰冻切片,有的一抗只能做冰冻切片,这要看待测抗原的稳定性。有些抗原不稳定,检测到的抗原经过组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列步骤后,很容易被破坏。这时候只能用冰冻切片来做,而那些稳定的抗原只能用冰冻切片来做。经得起石蜡切片的考验,一般来说也可以做成冰冻切片。一般来说,对于冰冻切片和石蜡切片都能检测到的抗原,石蜡切片的染色效果要比冰冻切片好。2.从研究目的来说。石蜡切片对组织细胞的定位非常准确,而长期冰冻组织的冰冻切片由于冰晶的形成,可能会破坏组织细胞的形态结构,造成抗原的分散,所以定位不准确。3.从抗原的保真度来看。冰冻切片对抗原的保真性较好,而石蜡切片在组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡过程中可能会影响抗原的性质。4.看操作步骤的复杂程度。冰冻切片染色工艺简单,石蜡切片需要脱蜡入水、抗原修复等过程,比较复杂。5.总之,石蜡切片适合标本的长期保存,组织和细胞的形态结构保持良好;而冰冻切片适合制作新鲜组织的切片,然后立即固定,染色效果好,在免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰。(